植物蛋白质怎么测（植物蛋白的测定）

定氮法，双缩尿法（Biuret法）、Folin－酚试剂法（Lowry法）和紫外吸收法。考马斯亮蓝法（Bradford法）。

凯氏定氮 灵敏度低，适用于0.2~ 1.0mg氮，误差为 ±2％ 费时

8～10小时 将蛋白氮转化为氨，用酸吸收后滴定 非蛋白氮（可用三氯乙酸沉淀蛋白质而分离） 用于标准蛋白质含量的准确测定；干扰少；费时太长

双缩脲法（Biuret法） 灵敏度低 1～20mg 中速 20~30分钟 多肽键＋碱性Cu2＋®紫色络合物 硫酸铵；Tris缓冲液；某些氨基酸 用于快速测定，但不太灵敏；不同蛋白质显色相似

紫外吸收法 较为灵敏 50～100mg 快速 5～10分钟 蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基在280nm处的光吸收 各种嘌吟和嘧啶；

Folin－酚试剂法（Lowry法） 灵敏度高 ～5mg 慢速 40～60分钟 双缩脲反应；磷钼酸－磷钨酸试剂被Tyr和Phe还原 硫酸铵；Tris缓冲液；甘氨酸；

各种硫醇 耗费时间长；操作要严格计时；颜色深浅随不同蛋白质变化

考马斯亮蓝法(Bradford法) 灵敏度最高 1～5mg 快速5～15分钟 考马斯亮蓝染料与蛋白质结合时，其lmax由465nm变为595nm 强碱性缓冲液；

SDS 最好的方法；干扰物质少；颜色稳定； 颜色深浅随不同蛋白质变化

怎样验证植物中的蛋白质 脂肪 淀粉 糖类 需要什么工具

蛋白质用硝酸检验（蛋清加硝酸变黄）；脂肪用白纸（白纸变得透明）；淀粉用稀碘液（变蓝色）；葡萄糖用尿糖试纸检验；蔗糖用菲林试剂检验（加热成砖红色）。

我们的生活离不开蛋白质，这里，我带大家学习一下检测蛋白质的步骤。

01

首先是选择高蛋白的食物浆液，比如豆浆和蛋清。然后准备检测蛋白质的双缩脲试剂，由A液和B液组成，A液：氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液。B液：硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液。

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在实验时，需要现在待测液体中先在加入A液，先制造出碱性环境，满足B液与蛋白质反应的条件，这样才可以方便进行蛋白质的检测。

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放入1ml的A液后，再加入4滴B液在试管中，然后充分震荡使其混匀，观察其反应。

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一段时间后，如果试管中的液体变为紫色，说明待测液体中含有蛋白质，而且颜色深浅与蛋白质浓度成正比。

双缩脲法；Folin-酚试剂法；考马斯亮蓝法；紫外吸收法；具体可参考植物生理生化实验原理和技术这本书。

蛋白质组学

使用双向电泳按照等电点和大小将蛋白分开，用质谱来检测每一个点

缺陷：有蛋白点显示不出来；有区域分离状态一塌糊涂

基因组学/转录组学

通过高通量测序，通过拼接全基因组并预测所有基因；或者提取所有组织均一化后的mRNA逆转录

cDNA测序MAP或预测其蛋白

缺陷：拼接、预测、Map均会有错误率

上述方案是目前生物学手段能够达到的最大检测范围

用凯氏定氮法先测定出含N量，再根据蛋白质含N量一般为16%粗略算出蛋白质含量。

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